Spas ji bo serdana Nature.com. Guhertoya geroka ku hûn bikar tînin piştgirîya CSS-ê sînordar e. Ji bo ezmûna çêtirîn, em pêşniyar dikin ku hûn gerokek nûvekirî bikar bînin (an jî Moda Lihevhatinê ya di Internet Explorer de neçalak bikin). Di vê navberê de, ji bo misogerkirina piştgirîya domdar, em ê malperê bê şêwaz û JavaScript pêşkêş bikin.
Thermophile mîkroorganîzmayên ku di germahiyên bilind de pêşve diçin. Lêkolîna wan dikare agahdariya giranbiha peyda bike ka jiyan çawa bi şert û mercên giran re adapte dibe. Lêbelê, zehmet e ku meriv şertên germahiya bilind bi mîkroskopên optîkî yên kevneşopî bigihîje. Gelek çareseriyên malê-çêkirî yên li ser bingeha germkirina elektrîkê ya berxwedêr a herêmî hatine pêşniyar kirin, lê çareseriyek bazirganî ya hêsan tune. Di vê gotarê de, em têgeha germkirina lazerê ya mîkrokî li ser qada dîmenê ya mîkroskopê destnîşan dikin da ku germahiya bilind ji bo lêkolînên thermophile peyda bikin di heman demê de ku hawîrdora bikarhêner nerm dihêlin. Germkirina mîkropîvana bi tundî ya lazerê ya nerm dikare bi karanîna substratek nixumandî ya nanoparçeya zêr wekî ronahiyek biyolojîk û bikêrhatî were bidestxistin. Bandorên gengaz ên veguheztina şilavê ya mîkropîvan, ragirtina hucreyê, û tevgera termoforetîk a centrifûgal têne nîqaş kirin. Rêbaz di du cureyan de hatiye nîşandan: (i) Geobacillus stearothermophilus, bakteriyek termofîlî ya çalak ku di germahiya 65°C de zêde dibe. (ii) Thiobacillus sp., arkeayek hîpertermofîlî ya çêtirîn. li 80°C. Ev xebat rê li ber çavdêriya sade û ewledar a mîkroorganîzmayên termofîl bi karanîna amûrên mîkroskopî yên nûjen û erzan vedike.
Di nav mîlyaran salan de, jiyana li ser Erdê pêşve çûye da ku bi cûrbecûr şert û mercên hawîrdorê yên ku carinan ji hêla perspektîfa meya mirovî ve zehf têne hesibandin. Bi taybetî, hin mîkroorganîzmayên termofîl (bakterî, arkea, fungî) ku jê re termofîl tê gotin, di germahiya ji 45°C heya 122°C1, 2, 3, 4 de pêş dikeve. an herêmên volkanîk. Lêkolîna wan di van çend deh salên borî de ji ber kêmî du sedeman gelek eleqedar bûye. Pêşî, em dikarin ji wan fêr bibin, mînakî, ka termofîl 5, 6, enzîmên 7, 8 û membranên 9 çawa li germahiyên weha bilind îstîqrar in, an jî termofîl çawa dikarin li ber astên tund ên radyasyonê bisekinin10. Ya duyemîn, ew bingeh in ji bo gelek sepanên biyoteknolojîkî yên girîng1,11,12 yên wekî hilberîna sotemeniyê13,14,15,16, senteza kîmyewî (dihydro, alkol, metan, asîdên amînî, hwd.)17, biomining18 û biyokatalîstên termostable7,11, 13. Bi taybetî, reaksiyona zincîra polîmerazê ya ku niha tê zanîn (PCR)19 enzîmek (Taq polymerase) ku ji bakteriya termofîl Thermus aquaticus veqetandî ye, yek ji yekem termofîlên ku hatine keşfkirin, vedihewîne.
Lêbelê, lêkolîna thermophiles ne karekî hêsan e û nekare di laboratuarek biyolojîkî de were çêkirin. Bi taybetî, termofîlên zindî di vitro de bi mîkroskopa ronahiyê ya standard nayên dîtin, tewra bi odeyên germkirinê yên bazirganî yên berdest, bi gelemperî ji bo germahiyên bi qasî 40 °C têne destnîşankirin. Ji salên 1990-an û vir ve, tenê çend komên lêkolînê xwe dane danasîna pergalên mîkroskopî yên germahiya bilind (HTM). Di 1994 de Glukh et al. Odeya germkirin / sarkirinê li ser bingeha karanîna şaneyek Peltier ku germahiya kapîlarên çargoşeyî yên girtî kontrol dike ji bo domandina anaerobiyê 20 hate damezrandin. Amûr dikare heya 100 °C bi leza 2 °C/s were germ kirin, ev yek dihêle ku nivîskar li ser tevgera bakteriya hîpertermofîlî Thermotoga maritima21 lêkolîn bikin. Di 1999 de Horn et al. Amûrek pir dişibihe hatî pêşve xistin, hîn jî li ser bingeha karanîna kapîlarên germkirî yên ku ji bo mîkroskopî bazirganî ye ji bo lêkolîna dabeşkirina / girêdana hucreyê ye. Piştî demek dirêj a bêçalakîtiyê, lêgerîna HTM-yên bi bandor di sala 2012-an de ji nû ve dest pê kir, nemaze di girêdana bi rêze kaxezên koma Wirth de ku amûrek ku ji hêla Horn et al ve hatî vedîtin bikar anîn. Berî 15 salan, tevgera hejmareke mezin a arkeayan, di nav de hîpertermofîlan, di germahiyên heya 100 °C de bi karanîna kapîlarên germkirî hate lêkolîn kirin23,24. Wan her weha mîkroskopa orîjînal guhezand da ku bigihîje germbûna zûtir (çend hûrdeman li şûna 35 hûrdeman da ku bigihîje germahiya destnîşankirî) û bigihîjin pileyek germahiya xêzkirî ya ji 2 cm zêdetir li seranserê navîn. Ev amûra şikilkirina gradientê ya germahiyê (TGFD) ji bo lêkolîna livîna gelek termofîlan di nav pileyên germahiyê de li dûrên têkildar ên biyolojîkî 24, 25 hatî bikar anîn.
Germkirina kapîlarên girtî ne tenê riya çavdêriya termofîlên zindî ye. Di 2012 de, Kuwabara et al. Odeyên Pyrex-ê yên yekcar ên malê yên ku bi adhesive-berxwedêra germê (Super X2; Cemedine, Japonya) hatine morkirin hatin bikar anîn. Nimûne li ser plakaya germkirinê ya zelal a ku ji hêla bazirganî ve tê peyda kirin (Micro Heat Plate, Kitazato Corporation, Japonya) hatin danîn ku dikare heya 110 °C germ bike, lê di eslê xwe de ji bo biyoimagen ne hatî armanc kirin. Nivîskar li 65°C dabeşkirina bikêr a bakteriyên termofîl ên anaerobî (Thermosipho globiformans, dema ducarkirinê 24 hûrdem) dîtin. Di 2020 de, Pulshen et al. Germkirina bikêrhatî ya firaqên metal ên bazirganî (AttofluorTM, Thermofisher) bi karanîna du hêmanên germkirinê yên xwemalî hate xuyang kirin: qapek û qonaxek (avahengiya îlhama makîneya PCR). Ev hevbendî di germahiyek şilek yekdeng de encam dide û pêşî li evaporbûn û kondensasyona li binê qapaxê digire. Bikaranîna O-ring ji danûstendina gazê bi hawîrdorê re dûr dike. Ev HTM, bi navê Sulfoscope, ji bo wêneya Sulfolobus acidocaldarius di 75 °C27 de hate bikar anîn.
Sînorek naskirî ya van hemî pergalan sînorkirina karanîna armancên hewayê bû, her îxlalkirina neftê ji bo germahiyek wusa bilind û ji bo wênekêşana bi nimûneyên zelal ên qalind ên >1 mm negunca bû. Sînorek naskirî ya van hemî pergalan sînorkirina karanîna armancên hewayê bû, her îxlalkirina neftê ji bo germahiyek wusa bilind û ji bo wênekêşana bi nimûneyên zelal ên qalind ên >1 mm negunca bû. 2008-2012 12:00:00 PM 1 mm. Kêmasiyek naskirî ya van hemî pergalan sînorkirina karanîna armancên hewayê bû, ji ber ku her avdana neftê ji bo germahiyek wusa bilind û ji bo dîtinê bi navgîniya nimûneyên zelal > 1 mm stûr ne maqûl bû.所有这些系统的一个公认限制是限制使用空气物镜，任何油浸都不适合迕毫米厚的透明样品成像。 Sînorek naskirî ya van hemî pergalan sînorkirina karanîna neynek bi hewa ye, ji ber ku her imadkirina rûnê ji bo wênekirina nimûneyên zelal ên qalindiya 1 mm di germahiyên wusa bilind de negunca ye. Ji ber vê yekê kêmasiya hemî pergala pergalê ya ku bi karanîna sînorkirî ya hewayê ve girêdayî ye, lêbelê guheztina neftê ji bo tîrêjên germê yên tîrêjê >1. Kêmasiyek naskirî ya van hemî pergalan karanîna tixûbdar a lensên hewayê ye, her rijandina neftê ji bo germahiyên wusa bilind û xuyangkirina bi navgîniya nimûneyên zelal ên qalindiya 1 mm ne guncaw e.Di demên dawî de, ev sînor ji hêla Charles-Orzag et al. 28, yê ku amûrek çêkiriye ku êdî germê li dora pergala berjewendiyê peyda nake, lê di hundurê cama sergirtî ya xwe de, ku bi qatek zelal a zirav a berxwedanek ji ITO (oksîdê îndyûm-tin) hatî pêçandî, pêş xist. Bi derbaskirina herikîna elektrîkê di qata şefaf de qapax dikare heya 75 °C were germ kirin. Lêbelê, nivîskar divê lensê bi objektîfê jî germ bike, lê ne ji 65 °C bêtir, da ku zirarê nede wê.
Van xebatan destnîşan dikin ku pêşkeftina mîkroskopiya optîkî ya germahiya bilind bi berfirehî nehatiye pejirandin, bi gelemperî pêdivî bi alavên xwemalî heye, û bi gelemperî bi bihayê çareseriya cîhê tête bidestxistin, ku ev yek kêmasiyek ciddî ye ji ber ku mîkroorganîzmayên termofîl ji çend çendan mezintir nînin. mîkrometre. Kêmbûna qebareya germkirinê mifteya çareserkirina sê pirsgirêkên xwerû yên HTM ye: çareseriya belengaz, bêhêziya germî ya zêde dema ku pergal germ dibe, û germkirina zirardar a hêmanên derdorê (rûnê binavbûnê, lensên objektîf… an destên bikarhêner) di germahiyên giran de. ).
Di vê gotarê de, em ji bo çavdêriya thermophile ku ne li ser germkirina berxwedanê ye HTM destnîşan dikin. Di şûna wê de, me bi tîrêjkirina lazerê ya substratek ronahiyê di nav deverek tixûbdar a qada dîtinê ya mîkroskopê de germbûna herêmî bi dest xist. Dabeşkirina germahiyê bi karanîna mîkroskopiya qonaxa mîqdar (QPM) hate xuyang kirin. Bandoriya vê rêbazê ji hêla Geobacillus stearothermophilus, bakteriyek termofîl a tevgerî ya ku li ser 65 °C zêde dibe û demek kurt a ducarî (nêzîkî 20 hûrdeman) heye, û Sulfolobus shibatae, hîpertermofîlek ku bi rengek çêtirîn di 80 °C de mezin dibe (archae) tê destnîşan kirin. to illustrate. Rêjeya dubarekirina normal û avjenî wekî fonksiyonek germahiyê hate dîtin. Ev lazer HTM (LA-HTM) ne ji hêla qalindahiya perdeyê ve an jî ji hêla xwezaya armancê ve (hewa an nefta neftê) ve nayê sînorkirin. Ev dihêle ku her lensek bi rezîliya bilind a li sûkê were bikar anîn. Di heman demê de ew ji ber bêhêziya termalê jî ji germkirina hêdî dernakeve (li ser pîvanek milîsaniyeyê germbûna tavilê digihîje) û tenê hêmanên berdest ên bazirganî bikar tîne. Tenê fikarên ewlehiyê yên nû bi hebûna tîrêjên lazer ên hêzdar (bi gelemperî heya 100 mW) di hundurê cîhazê de û dibe ku bi çavan ve girêdayî ne, ku hewcedariya wan bi tîrêjên parastinê heye.
Prensîba LA-HTM ew e ku lazerek bikar bîne da ku nimûneya herêmî di hundurê qada dîtina mîkroskopê de germ bike (Hêjîr. 1a). Ji bo vê yekê, nimûne pêdivî ye ku ronahiyê bigire. Ji bo ku em hêzek lazerê ya maqûl bikar bînin (kêmtir ji 100 mW), me pişta xwe negirt ser vegirtina ronahiyê ji hêla navgîna şil ve, lê bi şêweyek çêkirî vegirtina nimûneyê zêde kir bi pêxistina substratê bi nanoparçeyên zêr (Hêjî. 1c). Germkirina nanoparçeyên zêr bi ronahiyê re ji bo qada plazmonîk a termal girîngiyek bingehîn e, digel sepanên bendewar ên di biyolojî, nanokîmya an berhevkirina tîrêja rojê de29,30,31. Di van çend salên borî de, me ev LA-HTM di gelek lêkolînên têkildarî serîlêdanên plasma yên germî yên di fîzîk, kîmya û biyolojiyê de bikar aniye. Zehmetiya sereke ya vê rêbazê di xuyangkirina profîla germahiya paşîn de ye, ji ber ku germahiya bilindkirî di nav nimûneyê de bi herêmek mîkrokî ve sînorkirî ye. Me destnîşan kir ku nexşeya germahiyê dikare bi navbeynkariya guhêzbar a çar-pêl ve were bidestxistin, rêbazek hêsan, bi rezîliya bilind, û pir hesas a mîkroskopî ya qonax a mîqdar a ku li ser bingeha karanîna gravên difraksiyonê yên du-alî ye (herweha wekî grîngên xaçê tê zanîn) 33,34,35,36. Pêbaweriya vê teknîka mîkroskopî ya germî, ku li ser bingeha mîkroskopa pêla pêla gewr a xaçkirî (CGM), di deh kaxezên ku di deh salên borî de hatine weşandin de hatî destnîşan kirin37,38,39,40,41,42,43.
Plana sazkirina mîkroskopa germkirina lazerê ya paralel, şikilandin û germahiyê. b Geometrîya nimûneyê ku ji jûreyek AttofluorTM pêk tê, ku tê de xêzek ku bi nanoparçeyên zêr hatiye pêçandin heye. c Bi baldarî li nimûneyê binêre (ne ku pîvanê). d profîla tîrêjê ya lazerê ya yekreng û (e) dabeşkirina germahiyê ya dûv re li ser plana nimûneya nanoparçeyên zêr temsîl dike. f profîlek tîrêjê ya lazerê ya nîgarê ye ku ji bo hilberîna germahiyek yekgirtî ya ku di simulasyona belavkirina germahiya encam de di (g) de hatî xuyang kirin de tête xuyang kirin. Bara pîvanê: 30 μm.
Bi taybetî, me di van demên dawî de germkirina hucreyên mammalan bi LA-HTM û CGM bi dest xist û bersivên şoka germa hucreyî di navbêna 37-42 °C de şopand, sepandina vê teknîkê ji bo wênekirina şaneya zindî ya yekane nîşan dide. Lêbelê, serîlêdana LA-HTM ji bo lêkolîna mîkroorganîzmayan di germahiyên bilind de ne zelal e, ji ber ku ew li gorî şaneyên mammalan bêtir hişyariyê hewce dike: Ya yekem, germkirina binê navîn bi dehan dereceyan (li şûna çend dereceyan) rê dide. ji bo gradient germahiya vertical xurt. dikare konveksyonek şilkî 44 biafirîne, ku heke bi zexmî bi substratê ve neyê girêdan, dikare bibe sedema tevgera nexwestî û tevlihevkirina bakteriyan. Bi kêmkirina qalindahiya tebeqeya şilavê ev vekêşî dikare were rakirin. Ji bo vê armancê, di hemî ceribandinên ku li jêr hatine pêşkêş kirin de, suspensionsên bakterî di navbera du çîpên ku bi qasî 15 μm stûr di hundurê kaseyek metal de hatine danîn (AttofluorTM, Thermofisher, Fig. 1b,c) hatine danîn. Di prensîbê de, ger stûrbûna şilavê ji mezinahiya tîrêjê ya lazera germkirinê piçûktir be, ji veguheztinê dûr dibe. Ya duduyan, xebitandina di geometrîyek weha sînordar de dikare organîzmayên aerobîk bifetisîne (binêre Fig. S2). Ev pirsgirêk dikare bi karanîna substratek ku ji oksîjenê (an gazek din a girîng) re derbas dibe, bi hiştina bilbilên hewayê yên asêbûyî di hundurê perdeyê de, an jî bi kolandina kunên di qapa jorîn de (binêre Fig. S1) 45 . Di vê lêkolînê de, me çareseriya paşîn hilbijart (Wêneyên 1b û S1). Di dawiyê de, germkirina lazerê dabeşkirina germahiya yekgirtî peyda nake. Tewra di heman tundiya tîra lazerê de (Hêl. 1d), belavkirina germahiyê ne yekreng e, lê ji ber belavbûna germahiyê dişibe dabeşkirina Gaussian (Hêl. 1e). Dema ku armanc ji bo lêkolîna pergalên biyolojîkî sazkirina germahiyên rast e li qada dîtinê, profîlên nehevseng ne îdeal in û di heman demê de dikarin bibin sedema tevgera termoforetîk a bakteriyan ger ku ew bi substratê ve negirin (binêre Fig. S3, S4)39. Ji bo vê mebestê, me modulatorek ronahiya fezayî (SLM) bikar anî da ku tîra lazerê ya infrasor li gorî şeklê zengilê (Hêjîrê. 1f) di plana nimûneyê de çêbike da ku di nav deverek geometrîkî ya diyarkirî de dabeşek germahiya bêkêmasî ya yekgirtî bi dest bixe. tevî belavbûna termalê (Hêl. 1d) 39, 42, 46. Kulîlkek jorîn li ser firaqek metalî bixin (Şikl 1b) da ku navgînê ji evaporasyonê dûr bixin û bi kêmanî çend rojan lê temaşe bikin. Ji ber ku ev qapaxa jorîn nayê mohrkirin, ger hewce be di her kêliyê de navgînek din bi hêsanî dikare were zêdekirin.
Ji bo ronîkirina ka LA-HTM çawa dixebite û sepandina wê di lêkolîna thermophilic de nîşan bide, me bakteriya aerobîk Geobacillus stearothermophilus lêkolîn kir, ku xwedan germahiya mezinbûnê ya herî baş a li dora 60-65 °C ye. Bakterî di heman demê de flagella û şiyana avjeniyê jî heye, ku nîşanek din a çalakiya normal a şaneyê peyda dike.
Nimûneyên (Hêjîra 1b) berî saetekê di 60°C de hatin înkubakirin û dûv re di hêlîna nimûneya LA-HTM de hatin danîn. Ev pêş-inkubasyon ji ber du sedeman vebijarkî ye, lê dîsa jî bikêrhatî ye: Yekem, gava lazer tê vemirandin, ew dihêle ku hucre tavilê mezin bibin û dabeş bibin (li fîlima M1 li Materyalên Pêvek binêre). Bêyî pêş-inkubasyonê, mezinbûna bakteriyan bi gelemperî bi qasî 40 hûrdeman dereng dikeve her gava ku cîhek nû ya dîtinê li ser nimûneyê tê germ kirin. Ya duyemîn, 1 demjimêran berî înkubasyonê girêdana bakteriyan li ser çîpekê pêşve xist, nahêle ku hucre ji qada dîtinê derbikevin ji ber termoforezê dema ku lazer hate pêxistin (li fîlima M2 binêre li Materyalên Pêvek). Thermophoresis tevgera pirtikan an jî molekulan li ser deverek germahiyê ye, bi gelemperî ji germ ber bi sar ve, û bakterî jî îstîsna ne43,47. Ev bandora nexwestî li ser deverek diyarkirî bi karanîna SLM-ê ji bo şeklêdana tîrêjê lazerê û bidestxistina dabeşek germahiyek guncan tê rakirin.
Li ser hêjîrê. Xiflteya 2 belavbûna germahiyê ya ku ji hêla CGM-ê ve hatî pîvandin nîşan dide ku bi tîrêjkirina binê şûşeyek ku bi nanoparçeyên zêr hatî pêçandî bi tîrêjek lazerê ya lûlekirî hatî peyda kirin (Wêne. 1f). Dabeşkirinek germahiyek guncan li seranserê devera ku ji hêla tîrêjê lazerê ve hatî vegirtin hate dîtin. Ev herêm ji bo 65 ° C, germahiya mezinbûna çêtirîn hate danîn. Li derveyî vê herêmê, kêşeya germê bi xwezayî dikeve \(1/r\) (ku \(r\) koordînata radîal e).
nexşeyek germahiyê ya pîvandinên CGM-ê ku bi karanîna tîrêjek lazerê ya nîgarê hatî wergirtin ji bo tîrêjkirina qatek nanoparçeyên zêr ji bo bidestxistina profîlek germahiyek guncan li ser deverek dorveger. b Îzoterma nexşeya germahiyê (a). Rêzika tîrêjê ya lazerê bi çemberek xalîçeyek gewr tê temsîl kirin. Ezmûn du caran hate dubare kirin (binêre Materyalên Pêvek, Figure S4).
Zindîbûna hucreyên bakterî bi karanîna LA-HTM çend demjimêran hate şopandin. Li ser hêjîrê. 3 ji bo çar wêneyên ku ji fîlimek 3 saet û 20 hûrdemî hatine kişandin navbera demê nîşan dide (Fîlm M3, Agahdariya Pêvek). Bakterî hate dîtin ku bi rengek çalak di nav devera dorhêl a ku ji hêla lazerê ve hatî destnîşan kirin de ku germahî herî baş e, ku nêzî 65 °C ye, belav dibin. Berevajî vê, mezinbûna hucreyê bi girîngî kêm bû dema ku germahî ji bo 10 seqeyan daket binê 50 ° C.
Wêneyên kûrahiya optîkî yên bakteriya G. stearothermophilus ku piştî germkirina lazerê di demên cûda de mezin dibin, (a) t = 0 hûrdem, (b) 1 h 10 hûrdem, (c) 2 h 20 hûrdem, (d) 3 h 20 min, ji 200 Ji fîlimek yek hûrdemî (fîlmê M3 ku di Agahdariya Pêvek de hatî peyda kirin) hatî derxistin, ku li ser nexşeya germahiyê ya têkildar hatî danîn. Laser dema \(t=0\) vedibe. Îzoterm li wêneyê tundiyê hatine zêdekirin.
Ji bo hêjmara mezinbûna hucreyê û girêdayîbûna wê ya bi germahiyê re, me zêdebûna biyomasa koloniyên cihêreng ên bakteriyên di destpêkê de veqetandî di qada dîmenê ya Movie M3 de pîva (Hêjî. 4). Bakteriyên dêûbav ên ku di destpêka damezrandina yekîneya avakirina koloniya piçûk (mCFU) de hatine hilbijartin di Figure S6 de têne xuyang kirin. Pîvana girseya hişk bi kamerayek CGM 48 ku ji bo nexşeya belavkirina germahiyê hate bikar anîn hate girtin. Kapasîteya CGM ya pîvandina giraniya hişk û germahiyê hêza LA-HTM ye. Wekî ku tê hêvî kirin, germahiya bilind bû sedema zûtirbûna mezinbûna bakteriyan (Hêjîr. 4a). Wekî ku di xêza 4b de di nexşeya nîv-logê de tê xuyang kirin, mezinbûna li hemî germahiyê li dû mezinbûna qawetan tê, ku dane fonksiyona berfireh bikar tîne \(m={m}_{0}{10}^{t/\ tau }+ {{ \mbox{cst}}}\), ku \(\tau {{{{{\rm{log }}}}}}2\) - dema nifşê (an dema ducarkirinê), \( g =1/ \tau\) - rêjeya mezinbûnê (hejmara dabeşan di yekîneya demê de). Li ser hêjîrê. 4c rêjeya mezinbûnê û dema nifşê wekî fonksiyonek germahiyê nîşan dide. MCFU-yên ku zû mezin dibin piştî du demjimêran bi têrbûna mezinbûnê têne diyar kirin, tevgerek çaverêkirî ji ber tîrêjiya bakterî ya bilind (mîna qonaxa rawestayî ya di çandên şilav ên klasîk de). Şêweyê giştî \(g\çep(T\rast)\) (Hêjîrê. 4c) ji bo G. stearothermophilus bi rêjeya mezinbûnê ya herî baş li dor 60-65°C re li gorî qertafa du-qonaxê ya çaverêkirî ye. Daneyên bi modela kardînal bi hev re bidin hev (Wêne S5)49 li wir \(\çep({{G}_{0}{;\;T}}_{{\min }};{T}_{{opt} } ;{T}_{{\max}}\rast)\) = (0,70 ± 0,2; 40 ± 4; 65 ± 1,6; 67 ± 3) °C, ku bi nirxên din ên ku di edebiyatê de hatine destnîşan kirin baş li hev dike49. Her çend parametreyên girêdayî germahiyê ji nû ve werin hilberandin, rêjeya mezinbûna herî zêde ya \({G}_{0}\) dibe ku ji ceribandinek ji ceribandinek din cûda bibe (li jimareyên S7-S9 û fîlimê M4 binêre). Berevajî pîvanên guncandî yên germahiyê, ku divê gerdûnî bin, rêjeya mezinbûnê ya herî zêde bi taybetmendiyên navgîniyê (hebûna maddeyên xurek, giraniya oksîjenê) di nav geometriya mîkropîvana çavdêrî de girêdayî ye.
mezinbûna mîkrobial di germahiyên cûda de. mCFU: Yekîneyên Çêkirina Koloniya Minyatur. Daneyên ku ji vîdyoyek yek bakterîyek ku di pileyek germahiyê de mezin dibe (fîlim M3) hatine wergirtin. b Eynî wek (a), pîvana nîv-logarîtmîk. c Rêjeya mezinbûnê\(\tau\) û dema nifşê\(g\) ji paşveçûna xêzik (b) tê hesibandin. Barên xeletiya asoyî: Rêjeya germahiyê ya ku mCFU di dema mezinbûnê de berbi qada dîtinê vekir. Barên xeletiya vertîkal: Çewtiya standard a regresyona xêzkirî.
Digel mezinbûna normal, hin bakterî carinan di dema germkirina lazerê de li ber çavan diherikin, ku ji bo bakteriyên bi flagella re tevgerek çaverêkirî ye. Fîlmê M5 di agahdariya zêde de çalakiyên avjeniyê yên weha nîşan dide. Di vê ceribandinê de, tîrêjên lazerê yên yekgirtî ji bo afirandina pileyek germahiyê, wekî ku di jimarên 1d, e û S3 de têne xuyang kirin, hate bikar anîn. Wêneyê 5 du rêzikên wêneyê yên ji fîlima M5 hatine hilbijartin destnîşan dike ku nîşan dide ku yek bakterî tevgera arasteyî nîşan dide dema ku hemî bakteriyên din bêtevger dimînin.
Du çarçeweyên demê (a) û (b) avjeniya du bakteriyên cihêreng ên bi dorhêlên xalîkirî nîşan didin. Wêneyên ji fîlima M5 (wek materyalek pêvek hatî peyda kirin) hatine derxistin.
Di rewşa G. stearothermophilus de, tevgera çalak a bakteriyan (Hêl. 5) çend saniyeyan piştî ku tîrêja lazerê hate vekirin dest pê kir. Ev çavdêrî li ser bersiva demkî ya vê mîkroorganîzma termofîl a li ser zêdebûna germahiyê, wekî ku berê ji hêla Mora et al ve hatî dîtin, tekez dike. 24 . Mijara tevgera bakterî û tewra thermotaxis dikare bi karanîna LA-HTM bêtir were lêkolîn kirin.
Pêdivî ye ku avjeniya mîkrobî bi celebên din ên tevgera laşî re neyê tevlihev kirin, ango (i) tevgera Brownî, ku xuya dike ku tevgerek kaotîk e bêyî rêgezek diyar, (ii) vekêşana 50 û thermophoresis 43, ku ji tevgerek birêkûpêk a li ser germahiyek pêk tê. gradient.
G. stearothermophilus bi şiyana xwe ya hilberîna sporên pir berxwedêr (çêbûna spore) tê zanîn dema ku ji şert û mercên nebaş ên hawîrdorê re wekî parastinê tê nasîn. Dema ku şert û mercên hawîrdorê dîsa xweş dibin, spor şîn dibin, şaneyên zindî çêdikin û mezinbûnê ji nû ve dest pê dikin. Her çend ev pêvajoyek sporulasyon / şînbûn baş tê zanîn jî, ew çu carî di wextê rast de nehatiye dîtin. Bi karanîna LA-HTM, em li vir yekem çavdêriya bûyerên germbûnê li G. stearothermophilus radigihînin.
Li ser hêjîrê. 6a dîmenên demdirêj ên kûrahiya optîkî (OT) ku bi karanîna komek CGM ya 13 spore hatine wergirtin nîşan dide. Ji bo tevahiya dema berhevkirinê (15 h 6 min, \(t=0\) - destpêka germkirina lazerê), 4 ji 13 sporan şîn dibin, di xalên demê de li pey hev \(t=2\) h, \( 3\ ) h \(10 \)', \(9\) h \(40\)' û \(11\) h \(30\)'. Her çend tenê yek ji van bûyeran di xêza 6-ê de tê xuyang kirin, 4 bûyerên germbûnê di fîlima M6 de di materyalê pêvek de têne dîtin. Balkêş e, ku germbûn bi tesadufî xuya dike: tevî heman guhertinên di şert û mercên hawîrdorê de, hemî spor di heman demê de şîn nabin û şîn nabin.
Dem-lapse ku ji 8 wêneyên OT pêk tê (binavbûna rûnê, 60x, 1.25 NA armanc) û (b) pêşkeftina biomasê ya tevheviyên G. stearothermophilus. c (b) Li ser pîvanek nîv-log hatî xêzkirin da ku xêzbûna rêjeya mezinbûnê (xêza şikestî) ronî bike.
Li ser hêjîrê. 6b,c biyomasa nifûsa hucreyê ya li qada dîtinê wekî fonksiyonek demê di tevahiya serdema berhevkirina daneyan de nîşan dide. Hilweşîna bilez a girseya hişk ku di \(t=5\)h de di jimarê de tê dîtin. 6b, c, ji ber derketina hin şaneyan ji qada dîtinê. Rêjeya mezinbûna van çar bûyeran \(0,77\pm 0,1\) h-1 e. Ev nirx ji rêjeya mezinbûnê ya ku bi jimar 3. 3 û 4 ve girêdayî ye, ku şaneyên normal mezin dibin, bilindtir e. Sedema zêdebûna rêjeya mezinbûna G. stearothermophilus ji sporan ne diyar e, lê ev pîvandin berjewendiya LA-HTM ronî dikin û di asta yek hucreyê de (an di asta yek mCFU de) dixebitin da ku di derheqê dînamîkên jiyana hucreyê de bêtir fêr bibin. .
Ji bo ku em pirrengiya LA-HTM û performansa wê di germahiyên bilind de bêtir destnîşan bikin, me mezinbûna Sulfolobus shibatae, arkeayek acidophilic hyperthermophilic bi germahiya mezinbûna 80 °C51 ya optimum vekoland. Li gorî G. stearothermophilus, van arkeayan di heman demê de xwedî morfolojîyek pir cûda ne, dişibin zozanên 1 mîkron (cocci) ne ji darên dirêjkirî (bacil).
Figure 7a ji wêneyên kûrahiya optîkî yên li pey hev ên S. shibatae mCFU pêk tê ku bi karanîna CGM-ê hatine wergirtin (binihêrin fîlima taybetmendiya M7 di Materyalên Pêvek de). Ev mCFU li dora 73 ° C, li jêr germahiya optimum 80 ° C, lê di nav germahiya ji bo mezinbûna çalak de mezin dibe. Me gelek bûyerên veqetandinê dît ku mCFUs piştî çend demjimêran mîna mîkrotirên arkeayan xuya kirin. Ji van wêneyên OT, biomasa mCFU bi demê re hate pîvandin û di Figure 7b de hate pêşkêş kirin. Balkêş e, S. shibatae mCFUs mezinbûna xêzikî ji mezinbûna berbiçav ku bi G. stearothermophilus mCFUs re tê dîtin, nîşan da. Li ser xwezaya rêjeyên mezinbûna şaneyê nîqaşek demdirêj 52 heye: dema ku hin lêkolîn rêjeyên mezinbûna mîkroban rapor dikin ku bi mezinbûna wan re têkildar in (mezinbûna berbiçav), hinên din rêjeyek domdar (mezinbûna xêzik an dualî) nîşan didin. Wekî ku ji hêla Tzur et al.53 ve hatî ravekirin, cihêkirina di navbera mezinbûna berbiçav û (bi) xêz de, di pîvandina biomassê de rastbûnek <6% hewce dike, ku ji bo piraniya teknîkên QPM-ê ne gengaz e, tewra tevlêbûna navberê jî heye. Wekî ku ji hêla Tzur et al.53 ve hatî ravekirin, cihêkirina di navbera mezinbûna berbiçav û (bi) xêz de, di pîvandina biomassê de rastbûnek <6% hewce dike, ku ji bo piraniya teknîkên QPM-ê ne gengaz e, tewra tevlêbûna navberê jî heye. Kak ji bo zelalkirina Tûr û dr.53, rengvedana eksponencial û (bi)lineynogo rosta rastbûna <6% ji zêdebûna biomassы, ji kêmasiya ji bo pirtirkêmtirîna rêbaza QPM-ê, ji bo bikaranîna interferometrîyên pirzimanî. Wekî ku ji hêla Zur et al.53 ve hatî ravekirin, cihêkirina di navbera mezinbûna berbiçav û (bi) xêz de, di pîvandinên biomassê de <6% rastbûna hewce dike, ku ji bo piraniya rêbazên QPM-ê, tewra bi karanîna interferometrî jî nayê bidestxistin.Wekî ku ji hêla Zur et al. 53, cihêkirina di navbera mezinbûna berbiçav û (bi) xêz de, di pîvandinên biomassê de ji% 6 kêmtir rastbûn hewce dike, ku ji bo piraniya rêbazên QPM-ê ne gengaz e, tewra dema ku navber tê bikar anîn. CGM di pîvandinên biomassê de bi rastbûna sub-pg-ê vê rastbûnê bi dest dixe36,48.
Demjimêrek ku ji 6 wêneyên OT pêk tê (navbirina rûnê, 60x, armanca NA 1.25) û (b) pêşkeftina biomasa mîkro-CFU ya ku bi CGM-ê tê pîvandin. Ji bo bêtir agahdarî li fîlmê M7 binêrin.
Mezinbûna tam xêzikî ya S. shibatae neçaverê bû û hêj nehatiye ragihandin. Lêbelê, mezinbûna berbiçav tête hêvî kirin, bi kêmanî ji ber ku bi demê re, dabeşên pirjimar ên 2, 4, 8, 16 ... divê çêbibin. Me hîpotez kir ku mezinbûna xêzikî dibe ku ji ber astengkirina hucreyê ji ber pakkirina hucreya hişk be, çawa ku mezinbûna hucreyê hêdî dibe û di dawiyê de digihîje rewşek xewê dema ku tîna şaneyê pir zêde be.
Em di encamê de li ser pênc xalên balkêş ên jêrîn nîqaş dikin: kêmkirina qebareya germkirinê, kêmkirina bêhêziya germî, eleqeya nanoparçeyên zêr, berjewendiya mîkroskopiya qonaxa mîqdar, û rêjeyek germahiya gengaz a ku tê de LA-HTM dikare were bikar anîn.
Li gorî germkirina berxwedêr, germkirina lazerê ya ku ji bo pêşkeftina HTM tê bikar anîn gelek feydeyan peyda dike, ku em di vê lêkolînê de destnîşan dikin. Bi taybetî, di medyaya şilavê de di warê dîtina mîkroskopê de, hêjeya germkirinê di nav çend (10 μm) 3 voltan de tê girtin. Bi vî rengî, tenê mîkrobên çavdêrîkirî çalak in, dema ku bakteriyên din razayî ne û dikarin ji bo lêkolîna nimûneyê bêtir werin bikar anîn - her carê ku pêdivî ye ku germek nû were kontrol kirin ne hewce ye ku nimûneyê biguhezîne. Ji bilî vê, germkirina mîkropîvan destûrê dide muayeneya rasterast a rêzek mezin a germahiyê: Figure 4c ji fîlimek 3 demjimêran (Fîlm M3) hate wergirtin, ku bi gelemperî pêdivî bi amadekirin û lêkolîna çend nimûneyan heye - yek ji bo her nimûneyên di bin lêkolînê de. y germahîya ku hejmara rojên ceribandinê temsîl dike. Kêmkirina qebareya germkirî di heman demê de hemî hêmanên optîkî yên derdorê yên mîkroskopê, nemaze lenseya objektîf, di germahiya odeyê de digire, ku heya nuha pirsgirêkek mezin e ku civakê pê re rû bi rû maye. LA-HTM dikare bi her lensek re were bikar anîn, tevî lensên nixumandina rûnê, û dê di germahiya odeyê de jî bi germahiyên giran ên di qada dîtinê de bimîne. Kêmasiya sereke ya rêbaza germkirina lazerê ya ku em di vê lêkolînê de radigihînin ev e ku hucreyên ku xwe nagirin an nelivînin dibe ku ji qada dîtinê dûr bin û lêkolîna wan dijwar be. Rêbazek dikare ev be ku meriv lensên mezinkirina kêm bikar bîne da ku bigihîje bilindbûna germahiyek mezintir ji çend sed mîkronan. Ev hişyarî bi kêmbûna çareseriya mekan re tê, lê heke armanc lêkolîna tevgera mîkroorganîzmayan be, çareseriya bilind a cîhê ne hewce ye.
Pîvana dema germkirinê (û sarkirinê) pergalê \({{{{{\rm{\tau }}}}}}}}_{{{\mbox{D}}}}\) bi mezinahiya wê ve girêdayî ye. li gor qanûnê \({{{({\rm{\tau }}}}}}}_{{{\mbox{D}}}}={L}^{2}/D\), li ku \ (L\) mezinahiya karakterîstîkî ya çavkaniya germê ye (pîvaza tîrêjê lazerê di lêkolîna me de \(L\ bi qasî 100\) μm ye), \(D\) belavbûna germî ya hawîrdorê ye (navîn di nav me de doz, cam û avê Rêjeya belavbûnê\(D\ bi qasî 2\qat {10}^{-7}\) m2/s. Ji ber vê yekê, di vê lêkolînê de, bersivên demê yên rêza 50 ms, ango, hema hema wê gavê). Guhertinên germahiyê, dikare were hêvîkirin Ev sazkirina tavilê ya bilindbûna germahiyê ne tenê dirêjahiya ceribandinê kurt dike, lê di heman demê de ji bo her lêkolînek dînamîkî ya bandorên germahiyê destûr dide demajoya rast.
Rêbaza me ya pêşniyarkirî ji bo her substratek ronahiyê vedigire (mînakî, nimûneyên bazirganî yên bi pêlava ITO) ve tê sepandin. Lêbelê, nanoparçeyên zêr dikarin di navgîniya infrasor de vegirtinek bilind û di rêza xuyangê de kêmbûnek peyda bikin, taybetmendiyên paşîn ên ku ji bo çavdêriya optîkî ya bandorker a di rêza xuyangê de balkêş in, nemaze dema ku fluorescence bikar tînin. Wekî din, zêr biyolojîk e, ji hêla kîmyewî ve bêhêz e, dendika optîkî dikare ji 530 nm berbi infrasorê nêzîk ve were sererast kirin, û amadekirina nimûneyê hêsan û aborî ye29.
Mîkroskopiya pêlê ya gewr a transversal (CGM) ne tenê nexşeya germahiyê di pîvanê de, lê di heman demê de çavdêriya biomassê jî dihêle, ku wê bi taybetî bi LA-HTM re bikêr e (heke ne hewce be). Di deh salên borî de, teknîkên mîkroskopî yên germahiyê yên din hatine pêşve xistin, nemaze di warê biyoimagen de, û piraniya wan hewceyê karanîna sondajên fluorescent-hesas ên germahiyê ne54,55. Lêbelê, ev rêbaz hatine rexne kirin û hin rapor guheztinên germahiyê yên nerealîst di nav hucreyan de pîvandin, dibe ku ji ber vê yekê ku florans ji bilî germahiyê bi gelek faktorên din ve girêdayî ye. Digel vê yekê, piraniya sondajên fluorescent di germahiyên bilind de ne aram in. Ji ber vê yekê, QPM û bi taybetî CGM teknîkek mîkroskopiya germahiya îdeal temsîl dikin ji bo xwendina jiyanê di germahiyên bilind de bi karanîna mîkroskopa optîkî.
Lêkolînên li ser S. shibatae, ku di 80°C de bi rengek çêtirîn dijîn, destnîşan dikin ku LA-HTM dikare ji bo lêkolîna hîpertermofîlan, ne tenê termofîlên hêsan, were sepandin. Di prensîbê de, ti sînorek ji rêza germahiyên ku bi karanîna LA-HTM dikare bigihîje tune ye, û tewra germahiya jorî 100 ° C jî dikare di zexta atmosferê de bêyî kelandinê were gihîştin, wekî ku ji hêla koma me ya 38-an ve di sepanên kîmya hîdrotermal de li atmosferê hatî destnîşan kirin. zext A. Laserek ji bo germkirina nanoparçeyên zêr 40 bi heman rengî tê bikar anîn. Bi vî rengî, LA-HTM xwedan potansiyela ku were bikar anîn ji bo çavdêriya hîpertermofîlên nedîtî bi mîkroskopiya optîkî ya bilind a standard di bin şert û mercên standard de (ango di bin stresa jîngehê de) were bikar anîn.
Hemî ceribandin bi karanîna mîkroskopa xwemalî, di nav de ronahiya Köhler (bi LED, M625L3, Thorlabs, 700 mW), xwedan nimûneyê bi tevgera xy ya destan, armanc (Olympus, 60x, 0.7 NA, hewa, LUCPlanFLN60X an 625x, NA1) hatin kirin. , UPLFLN60XOI), kamera CGM (QLSI xaça gemarê, 39 μm piyan, 0,87 mm ji senzorê kamera Andor Zyla) ji bo peydakirina tundî û wêneya pêlê, û kamera sCMOS (ORCA Flash 4.0 V3, moda 16-bit, ji Hamamatsu) tomar dike. Daneyên ku di jimar 5 de têne xuyang kirin (swimming bakterî). Parçekera tîrêjê ya dichroic qiraxek BrightLine 749 nm e (Semrock, FF749-SDi01). Parzûna li ber kamerayê parzûnek derbasbûna kurt a 694 e (FF02-694 / SP-25, Semrock). Lazera yaqûtê ya tîtanyûmê (Laser Verdi G10, 532 nm, 10 W, valahiya lazerê ya tsunamî ya pompekirî, Spectra-Physics di Xiflteya 2-5 de, bêtir bi lazera Millenia, Spectraphysics 10 W, pompeya Mira lazer cavity, Coherent, ji bo Fig. -5). 6 û 7) bi dirêjahiya pêlê \({{{({\rm{\lambda }}}}}}=800\) nm hatine danîn, ku bi spekrûma rezonansê ya plazmonê ya nanoparçeyên zêr re têkildar e. Modulatorên ronahiyê yên fezayî (1920 × 1152 pixel) ji Meadowlark Optics hatin kirîn.
Mîkroskopiya pêlê ya xaçê (CGM) teknîkek mîkroskopî ya optîkî ye ku li ser berhevkirina grîngek dabeşkirinê ya du-dimensî (herweha wekî grating xaç tê zanîn) li dûrahiya yek milîmetre ji senzorek kamerayek kevneşopî pêk tê. Mînaka herî gelemperî ya CGM-ya ku me di vê lêkolînê de bikar aniye, jê re tê gotin interferometreya guheztina veguhêz a çar-pêl (QLSI), ku tê de xêzkirin ji şêwazek kontrolê ya tundî / qonax pêk tê ku ji hêla Primot et al ve hatî destnîşan kirin û patent kirin. di sala 200034an de. Xêzên gewriyê yên vertîkal û horîzontal li ser senzorê siyên mîna şebek diafirînin, ku tehlîlkirina wan dikare di wextê rast de bi hejmarî were hilberandin da ku guheztina bera pêlê ya optîkî (an jî profîla qonaxê ya hevwate) ya ronahiya bûyerê were bidestxistin. Dema ku li ser mîkroskopê tê bikar anîn, kamerayek CGM dikare cûdahiya riya optîkî ya tiştek wênekirî, ku wekî kûrahiya optîkî (OT) jî tê zanîn, bi hestiyariyek li ser rêza nanometeran nîşan bide36. Di her pîvandina CGM de, ji bo ku tu kêmasiyên di hêmanên optîkî an tîrêjan de ji holê rabin, pêdivî ye ku wêneyek OT-ya referansa bingehîn were girtin û ji her wêneyên paşîn were derxistin.
Mîkroskopiya germahiyê bi karanîna kamerayek CGM wekî ku di referansê de hatî destnîşan kirin hate kirin. 32. Bi kurtasî, germkirina şilek nîşana refraksiyonê diguhezîne, bandorek lensek germî çêdike ku tîrêjê rûdanê berovajî dike. Ev tehlûkeya pêlê ji hêla CGM-ê ve tê pîvandin û bi karanîna algorîtmayek veqetandinê tê pêvajo kirin da ku dabeşek germahiyê ya sê-alî di navgîna şilavê de were bidestxistin. Ger nanoparçeyên zêr bi rengek wekhev li seranserê nimûneyê belav bibin, nexşeya germahiyê dikare li deverên bê bakterî were çêkirin da ku wêneyên çêtir çêbike, ya ku em carinan dikin. Wêneyê referansê CGM bêyî germkirinê (bi lazerê veqetandî) hate wergirtin û dûv re li heman cîhê wêneyê bi lazerê ve hate girtin.
Pîvana girseya hişk bi karanîna heman kamera CGM-ê ya ku ji bo wênekêşana germahiyê tê bikar anîn tê bidestxistin. Wêneyên referansa CGM-ê di dema xuyangkirinê de wekî navgînek ku ji ber hebûna bakteriyan di OT-ê de nehomojenîyek navînî diguhezîne bi lez guheztina nimûneyê di x û y de hatine wergirtin. Ji wêneyên OT yên bakteriyan, biomasa wan bi karanîna komek wêneyan li ser deverên ku bi karanîna algorîtmaya dabeşkirina malê ya Matlab-ê hatine hilbijartin (binihêre beşa "Koda hejmarî"), li dû prosedûra ku di ref. 48. Bi kurtasî, em têkiliya \(m={\alpha}^{-1}\iint {{\mbox{OT}}}\left(x,y\rast){{\mbox{d}} bikar tînin } x{{\mbox{d}}}y\), ku \({{\mbox{OT}}}\çep(x,y\rast)\) wêneya kûrahiya optîkî ye, \(m\) ye giraniya hişk û \({{{{\rm{\alpha }}}}}}\) sabit e. Me \({{{{\rm{\alpha))))))=0.18\) μm3/pg hilbijart, ku ji bo şaneyên zindî domdarek normal e.
Kulîlkek 25 mm bi qalind û 150 μm stûr ku bi nanoparçeyên zêr hatî pêçandî li jûreyek AttofluorTM (Thermofisher) bi nanoparçeyên zêr ber bi jor ve hate danîn. Geobacillus stearothermophilus di şevekê de di navgîniya LB de (200 rpm, 60 ° C) berî her roja ceribandinê hate çandin. Dilopek ji 5 µl ji suspensionek G. stearothermophilus bi densîteya optîkî (OD) ji 0,3 heta 0,5, li ser slipek bi nanoparçeyên zêr hate danîn. Dûv re, qulikek dorpêçê ya bi dirêjahiya 18 mm bi qulikek bi dirêjahiya 5 mm li navendê hate avêtin li ser dilopê, û 5 μl suspensiona bakterî ya bi heman tîrêjiya optîkî çend caran li navenda qulê hate sepandin. Binavên li ser pêçan li gorî prosedûra ku di ref. 45 (ji bo bêtir agahdarî li Agahdariya Pêvek binêre). Dûv re 1 ml navgîniya LB-ê li ser pêlavê zêde bikin da ku pêşî li zuhabûna tebeqeya şilekê bigirin. Berga paşîn li ser qapaxa girtî ya jûreya Attofluor™ tê danîn da ku pêşî li evaporkirina navgînê di dema înkubasyonê de bigire. Ji bo ceribandinên germbûnê, me spore bikar anîn, ku, piştî ceribandinên konvansiyonel, carinan çîpa jorîn vedişêrin. Rêbazek bi heman rengî ji bo bidestxistina Sulfolobus shibatae hate bikar anîn. Sê roj (200 rpm, 75°C) çandiniya pêşîn a Thiobacillus serrata di navgîniya 182 (DSMZ) de hate kirin.
Nimûneyên nanoparçeyên zêr bi lîtografiya kopolîmera blokên micellar hatin amadekirin. Ev pêvajo bi berfirehî di Beşê de tête diyar kirin. 60. Bi kurtasî, miselên ku îyonên zêr vedihewînin bi tevlihevkirina copolymer bi HAuCl4 di toluene de hatine sentez kirin. Dûv re çîpên paqijkirî di nav çareseriyê de hatin avêtin û bi tîrêjên UV-ê li ber hebûna karmendek kêmker ji bo bidestxistina tovên zêr hatin derman kirin. Di dawiyê de, tovên zêr bi girêdana pêvekek bi çareseriyek avî ya KAuCl4 û etanolamine ji bo 16 hûrdeman hatin mezin kirin, ku di encamê de bi rêkûpêkek hema-periyodîk û pir yekgirtî ya nanoparçeyên zêr ên ne-ferîkî di infrasora nêzîk de çêbû.
Ji bo veguheztina interferograman li wêneyên OT, me algorîtmayek xwemalî, wekî ku di zencîreyê de berfireh e, bikar anî. 33 û wekî pakêtek Matlab di depoya giştî ya jêrîn de heye: https://github.com/baffou/CGMprocess. Pakêt dikare li ser bingeha înterferogramên tomarkirî (tevî wêneyên referansê) û dûrahiya rêza kamerayê, tundî û wêneyên OT hesab bike.
Ji bo hesabkirina şêwaza qonaxê ya ku li SLM-ê hatî sepandin da ku profîla germahiyek diyarkirî bi dest bixe, me algorîtmayek xwemalî ya berê pêşkeftî39,42 bikar anî ku di depoya gelemperî ya jêrîn de heye: https://github.com/baffou/SLM_temperatureShaping. Têketin qada germahiya xwestî ye, ku dikare bi dîjîtal an bi wêneyek bmp monochrome were saz kirin.
Ji bo dabeşkirina hucreyan û pîvandina giraniya wan a hişk, me algorîtmaya xweya Matlab ku di depoya gelemperî ya jêrîn de hatî weşandin bikar anî: https://github.com/baffou/CGM_magicWandSegmentation. Li ser her wêneyê, pêdivî ye ku bikarhêner li ser bakterî an mCFU-ya balkêş bikirtînin, hestiyariya wandê rast bikin, û hilbijartinê piştrast bikin.
Ji bo bêtir agahdarî li ser sêwirana lêkolînê, li Rapora Lêkolîna Xwezayê ya ku bi vê gotarê ve girêdayî ye binêre.
Daneyên ku encamên vê lêkolînê piştgirî dikin li ser daxwazek maqûl ji nivîskarên têkildar hene.
Koda çavkaniyê ya ku di vê lêkolînê de hatî bikar anîn di beşa Rêbazan de bi hûrgulî ye, û guhertoyên debugê dikarin ji https://github.com/baffou/ di depoyên jêrîn de werin dakêşandin: SLM_temperatureShaping, CGMprocess, û CGM_magicWandSegmentation.
Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK Insight li ser termofîl û sepanên wan ên berfireh. Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK Insight li ser termofîl û sepanên wan ên berfireh.Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. û Sharma, AK Pêşniyara termofîlan û serîlêdana wan a berfireh. Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK 深入了解嗜热菌及其广谱应用。 Mehta, R., Singhal, P., Singh, H., Damle, D. & Sharma, AK.Mehta R., Singhal P., Singh H., Damle D. û Sharma AK Têgihîştina kûr a thermophiles û cûrbecûr sepanan.3 Biyoteknolojî 6, 81 (2016).
Dema şandinê: Sep-26-2022